称重：根据培养基配方的比例，将牛肉提取物，蛋白胨和NaCl准确称入烧杯中。牛肉酱通常用玻璃棒挑出，在小烧杯或观察杯中称重，溶于热水，然后倒入烧杯中。也可以将其放在称量纸上，称量后直接放入水中。此时，如果将其稍加加热，牛肉糊将与称量纸分离，然后立即将纸页移开。

牛肉蛋白胨吸湿性强，称重时移动迅速。另外，在混合药物时，应严格防止药物混合。羊角面包用于一种药物，或在服用一种药物后，将其洗涤并干燥，然后称重另一种药物。不要在瓶子上盖错盖子。

过滤器：趁热时，用滤纸或多层纱布过滤以利于观察结果。如果没有特殊要求，则可以省略此步骤（此实验中无需过滤）。

包装：根据实验要求，所制备的培养基可以分为试管或锥形瓶。

在填充过程中，请注意不要让培养基粘附在试管或瓶子的嘴上，以免污染棉塞并造成污染。

（1）液体包装和包装的高度优选为试管的高度的约1/4。

（2）用于固体分装和分装的试管不得超过试管高度的1/5。灭菌后，应将其制成斜坡。分开的锥形瓶的体积不应超过锥形瓶的一半。

（3）半固体分装试管通常适合试管高度的1/3，并在灭菌后垂直凝结。

加塞：填充培养基后，将棉塞放在试管或三角瓶的嘴上，以防止外部微生物进入培养基并造成污染，并确保良好的通风性能（将棉塞的方法固定在背面此实验）。

绷带：堵塞后，将所有试管用麻绳绑起来，然后在卫生棉条上缠上一层牛皮纸，以防止灭菌过程中的冷凝水弄湿卫生棉条。使用标记指示介质名称，组和日期。塞子装满牛皮纸后，用麻绳将绳子包裹成松散的结。使用时很容易解开它。另外，使用标记指示介质名称，组和日期。

杀菌：通过在121.3℃下以1.05kg / cm高压灭菌20分钟，将上述培养基灭菌。如果由于特殊情况不能及时消毒，应将其放在冰箱中暂时存放。

搁置斜面：将灭菌后的试管培养基冷却至约50℃，将试管的棉塞端置于玻璃棒上，倾斜面的长度优选为试验总长度的一半以下。

无菌检查：将灭菌后的培养基放入37℃的温室中24-48小时，以检查灭菌是否完成。