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牛肉蛋白胨培养基的配制

发布时间:2024-07-17 浏览次数:

牛肉蛋白胨培养基的配制涉及多个步骤,包括计算成分用量、称量、溶化、灭菌、倒平板等。以下是具体的配制过程:

计算:首先,根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例,计算配制所需培养基的体积时各种成分的用量。这通常包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠和琼脂等。

称量:准确称取计算好的各种成分。牛肉膏由于比较黏稠,可以使用玻棒挑取并放在称量纸上称量。牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮,因此称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖。

溶化:将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取出称量纸。然后往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠,用玻棒搅拌使其溶解。接着加入琼脂,加热使其熔化。在此过程中,不断用玻棒搅拌以防止琼脂糊底导致烧杯破裂。

灭菌:将配制好的培养基转移到锥形瓶,放入高压蒸汽灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃条件下灭菌15-30min。同时,将培养皿放入干热灭菌箱内,在160-170℃下灭菌2h。

倒平板:待培养基冷却至约50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板。具体操作包括将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。然后右手拿锥形瓶使瓶口迅速通过火焰,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿。左手立即盖上培养皿盖。等待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,使皿盖在下、皿底在上。

通过上述步骤,可以成功配制出牛肉膏蛋白胨培养基,用于后续的微生物培养、分离、计数及鉴定等研究。

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