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牛肉蛋白胨是种应用十分广泛的天然培养基

发布时间:2024-06-23 浏览次数:

牛肉膏蛋白胨培养基又称为肉汤培养基,是一种应用十分广泛的天然培养基,主要用来培养细菌。其中的牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料,含糖、维生素、蛋白质等营养物质。牛肉膏能够为微生物的生长提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素。

实验材料:

牛肉膏5g、蛋白胨10、NaCl 5g、琼脂20g、蒸馏水定容至1000ml

实验步骤:

1.计算。根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例,计算配制500mL的培养基时各种成分的用量。

2.称量。准确称取各种成分。牛肉膏比较黏稠,可以用玻棒挑取,放在称量纸上称量。牛肉膏和蛋白陈都容易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖。

3.溶化。将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取出称量纸。往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠,用玻棒搅拌,使其溶解。加入琼脂,加热使其熔化。在此过程中,不断用玻棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。当琼脂完全熔化后,补加蒸馏水500mL。

4.灭菌。将配制好的培养基转移到锥形瓶,放入高压蒸汽灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃条件下,灭菌15-30min。将培养皿放入干热灭菌箱内,在160-170℃下灭菌2h。

5.倒平板。待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作如下:

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰。

③用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10-20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿盖。

④等待平板冷却凝固(大约5-10min)后,将平板倒过来放置,使皿盖在下、皿底在上。

该培养基的制作只是进行微生物培养的一步,准备好培养基才可以进行后续微生物的培养、分离、计数及鉴定等研究。生物学发展历史表明,诸多革命性的改变人类对生命认识的事件都与微生物有关。

牛肉蛋白胨

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